钱益清回到巴山县城，向山本清直述说现在的游击队是越来越强大，只有皇军亲自出马，才能打败喜春。山本清直本来打算亲自带着兵马去围剿猛虎抗日队，但他接到了一项秘密任务，让他全力保护一批日本专家，研制生化武器，尽快投入大战场。
日军把一批制造生化武器的设备往巴山县运过来，山本清直亲自带队出城护送，喜春得到山本清直将路过虎扑岭的情报，准备在虎扑岭埋伏日军，击杀山本，报仇雪恨。喜春正打算出击时，韩新枝拿着手枪上来，也要参战，喜春想要让她退下，一个弱女子怎么和小鬼子拼杀，但韩新枝不理睬喜春。
蒜头和王迅他们先拉响了早已埋好的地雷，战斗打响，喜春带着“猛虎”向山本清直冲杀了下去，打倒一批日军。山本清直让身边的亲信少佐川岛贞夫和武藤勇不要乱了阵脚，让武藤勇全力保护好制造生化武器的设备，自己和川岛贞夫杀向喜春他们。喜春使出双枪，连连击毙了好几个小鬼子，双方激烈搏杀，韩新枝拿着手枪也打死了三个小鬼子。
卢雨菲按照提前的约定，在坦克冲上来之时，只身一人手拿手榴弹钻到坦克下，炸毁坦克，自己也负伤。大家及时掩护，救走卢雨菲，鸡毛趁乱抢走了敌人的生化武器，送武器的军官也被打伤，山本疯狂的进攻游击队，大家弹药缺乏，为了引开敌人，大家分头撤退。喜春和李昌鹏被山本紧逼，喜春急中生智，用假的生化武器箱骗了山本，二人逃脱。
游击英雄第20集剧情介绍日本专家说明箱子特别重要，山本发誓天亮之前一定会抢回箱子。日军化妆为老百姓，趁夜袭击了武家村。吴家村毫无防备，被敌人袭击成功，抢走了箱子。
卢雨菲在战斗中受伤，李昌鹏悉心照顾，这让喜春看在眼里，嫉妒李昌鹏对卢雨菲好。
国民党旧部来到武家村，找到李昌鹏，要求其尽快返回部队，卢雨菲也极力劝说李昌鹏返回驻地，但是喜春希望李昌鹏留下来帮助自己打鬼子，李昌鹏再三考虑决定留下。
山本清直的妹妹山本幽兰从日本来中国探望哥哥，结果被黑龙山的土匪半路劫持，大当家想到山本欠了喜春的杀父血债，就转手把山本的妹妹交给喜春。喜春本想一刀杀了她，替父报仇，大家一致阻拦。
游击英雄第21集剧情介绍山本幽兰让喜春放了她，以绝食抵触喜春，喜春痛恨山本清直，强忍着怒火没有杀山本幽兰。李昌鹏隐隐地感觉到山本清直不会善罢甘休，劝说喜春带着“猛虎”离开武家村，喜春不听劝告，扬言要是山本清直敢来，就叫他有去无回。韩新枝出色的枪法，让喜春有些刮目相看，韩新枝让喜春做事不要太冲动，游击队就应该打完就撤，尤其是和山本清直这样装备精良的日军打仗。
山本清直回到巴山县城后，集结兵马，准备杀入武家村，将猛虎抗日支队一网打尽，救出妹妹。山本清直趁夜从村子的各个路口向游击队包围过来，等喜春发现有情况的时候，日军已近在眼前，喜春连忙带着人马起来反击，钱益清带着皇协军围捕喜春，想要报仇，喜春将他击退。日军攻势凶猛，游击队根本无法抵挡，一夜激战，猛虎抗日支队几乎全军覆没。